About1000 seedswere collectedfromdryfolliclesof anidentifiedsuperiorplantinthe dry deciduousforestareasof Nallamalais inKurnool districtof AndhraPrade...
13 downloads
25 Views
212KB Size
About 1000 seeds were collected from dry follicles of an identified superior plant in the dry deciduous forest areas of Nallamalais in Kurnool district of Andhra Pradesh during March-April 2001. After thorough washing with 1% labalene, 100 seeds were soaked for 2 h in sterile double distilled water containing 50 ppm Ga2. The imbibed seeds were surface sterilized with 30% H2O in a lami nar air flow chamber for five min followed by three rinses with sterilized double distilled water and inoculated aseptically on half-strenght MS (5) medium gelled with 0,6% (w/v) agar for seed germination and autoclaved at 121 degrees for 15 min after adjusting the pH at 5.8. The cultures were incubated under cool white fluorescent light with 36 mmol m-2 s-1 spectral flux photon (SFP) and 16/8h photoperiod at 25+- 2 degrees. Seedlings were used for obtaining in vitro nodal explants (0.5 cm). HgCl2 at 0.1% for 5 min was used for surface sterilization of in vivo nodal explants. The nodal explant were inoculated vertically on MS medium (3% surcrose) and on MS supplemented with different combinations of cytokinins (BA, KN, TDZ) and NAA.
Około 1000 nasion zostało zebranych z torebek włosowych/pęcherzyków od zidentyfikowanych lepszych roślin suchego lasu liściastego na terenie Nallamala w dystrykcie Kurnool ze stanu Andhra Pradesh ( Indie ) podczas marca-kwietnia 2001. Po dokładnym przemyciu za pomocą 1% labene (to chyba jakaś substancja xd nie wiem jaka nie ma w słowniku) , 100 nasion moczyło się przez 2 godziny w sterylnej podwójnie destylowanej wodzie zawierającej 50pmm Ga2. Powierzchnia przesiąkniętych nasion poddana jest sterylizacji za pomocą 30 procentowego H20 w komorze laminarnego przepływu powietrza przez 5 minut po czym następują 3 płukania za pomocą sterylizowanej podwójnej destylowanej wodzie i szczepienie w warunkach aseptycznych o połowie mocy MS (5) pożywka zżelowana z 0,6% (w/v) agarem dla kiełkowania nasion i autoklawowano w 121°C przez 15 minut po dostosowaniu pH 5,8. Hodowle zostały inkubowane w chłodnym biały fluorescencyjnym świetle z 36 mmol m-2 s-1 spektralnym strumieniem fotonów ( SFP) i 16/8h naświetlaniem w 25+-2 °C. Sadzonki zostały użyte do uzyskania in vitro przeszczepów węzłowych (0,5 cm). HgCl2 0,1% przez 5 minut wykorzystano do sterylizacji powierzchni in vivo węzłowych przeszczepów. Węzłowe eksplanty zaszczepiono pionowo na pożywce MS (3% sacharoza) i MS z dodatkiem różnych kombinacji cytokininy (BA, KN TDZ) i NAA.